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如何提高凍精技術,減少冷凍精子的損傷

日期:2019-09-04 / 人氣: / 來源:http://www.tynzb.com.cn/ / 作者:寶生海外

  成功的精子冷凍保存要求在解凍後保持精子結構和功能的完整性。為了保證正常的體内、體外受精能力,精子的細胞器必須在冷凍和解凍過程中得到保護,特别是頂體、鞭毛和中段等結構。
 

  然而,這些細胞器對冷凍損傷(例如滲透壓)的敏感性是不同的。有時候,當精子活動率得到很好保護時,或許頂體的完整性卻受到了嚴重的損傷。因此,設置理想的冷凍解凍流程在某種程度上是一門平衡的藝術。目前待解決的問題:如何提高冷凍技術,進一步減少冷凍對精子的損傷,提高精子冷凍複蘇率?

凍精

  1、對精子活動能力的影響

  冷凍可導緻精子運動能力受損,實驗結果顯示,冷凍後精子的活動率會下降。不同樣本、不同冷凍方法,其冷凍複蘇率不同。
 

  Oberoi等(2014)證實正常精液冷凍解凍後,精子的活動率會從86%下降到63%。Araki等(2015)采用微囊單精子冷凍,解凍後冷凍複蘇率在78%左右。Stein等(2015)采用冷凍環冷凍嚴重少弱精子症精子(每環10~20個精子),93%的樣本在解凍後至少能找到一個活動精子。Saeednia等(2015)采用正常精液精子進行冷凍,解凍後的冷凍複蘇率為82%。
 

  2、頂體損傷

  冷凍可導緻精子頂體的損傷,頂體損傷程度直接影響冷凍精子的受精能力。冷凍後部分精子會出現頂體腫脹及破損。頂體損傷主要發生于解凍時,嚴重時可緻精子死亡。與新鮮精子相比,冷凍精子獲能及頂體反應提前。
 

  3、精子質膜損傷

  冷凍和解凍過程可導緻精子質膜受損,進而損害精子的運動能力。膜損傷的程度可以通過測定細胞膜不飽和脂肪酸的脂類過氧化值(lipid peroxidation,LPO)确定。
 

  4、DNA損傷

  冷凍和解凍過程可引起精子DNA損傷。
 

  Spano等(1999)使用吖啶橙對精子頭進行DNA染色,發現冷凍後精子頭熒光強度下降,表明精子DNA的完整性受損。Chohan等(2004)進一步證實上述結果,同時發現不同個體精子DNA在冷凍後的損傷程度不同,因個體差異,部分個體的精子DNA更易因冷凍受損。
 

  有研究報道,當DNA受損的精子超過30%時精子無法正常受精,因此,Chohan等(2004)建議在使用冷凍精液進行人工授精前應檢測精子DNA的損害程度。

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